¿Cuál es el método de prueba para PS?

Oct 15, 2024 Dejar un mensaje

fosfatidilserinamejora la función de las células nerviosas, regula la transmisión de impulsos nerviosos y mejora la función de la memoria cerebral. Debido a su fuerte lipofilicidad, puede ingresar rápidamente al cerebro a través de la barrera hematoencefálica después de la absorción, desempeñando un papel en el alivio de las células del músculo liso vascular y aumentando el suministro de sangre al cerebro.

PS 2

 

Entonces, ¿cuál es el método de prueba?

1. Producto de muestra: fosfato idilserina

2.Contenido de la prueba: ensayo de PS

3.Principio: Después de la disolución o extracción del solvente, la muestra se separa por alta-

cromatografía líquida de alta resolución, detectada mediante detector UV y cuantificada mediante método estándar externo.

 

A.1 Instrumentos y equipos

A.1.1 Cromatografía líquida de alta resolución: detector UV: líquido Si 100 (o Si-60)

columna de cromatografía (250 mm x 4,6 mm, 5 μm).

A.1.2 Balanza analítica: sensibilidad 0.01mg.

A.1.3 Oscilador ultrasónico

 

A.2 Reactivos y Soluciones

A. 2.1 n-hexano: cromatográficamente puro A. 2.2 Acetonitrilo: cromáticamente puro

A.2.3 Metanol: Cromáticamente puro

A.2.4 Ácido fosfórico: cromatográficamente puro

A.2.5 Patrón de fosfato idilserina, con una pureza superior al 95%.

A.2.6 Preparación de la solución estándar

Tome una cantidad adecuada de sustancia de referencia de fosfatidilserina, pésela con precisión, disuélvala en n-hexano en secuencia y prepare cuantitativamente una solución de referencia.

que contiene {{0}}. 1 mg, 0.2 mg, 0.4 mg, 0,8 mg y 1,6 mg por 1 ml. Después de sellar, guárdelo a una temperatura inferior a -16 grados para uso futuro.

 

A. 3 pasos de análisis

A.3.1 Preparación de la muestra

Pese con precisión 50 mg de muestra de fosfato idilserina (con una precisión de 0,1 mg) y colóquela en un matraz volumétrico de 50 ml. Agregue una cantidad adecuada de n-hexano y someta a ultrasonidos durante 5 minutos para disolver la muestra. Después de volver a temperatura ambiente, use n-hexano para aumentar el volumen, agite

bien y prepare la solución de prueba.

A.3.2 Las condiciones cromatográficas de referencia son las siguientes:

a) Columna cromatográfica: columna de cromatografía líquida Si 100 (o Si-60) (250 mm × 4,6 mm, 5 μ m), o columna cromatográfica equivalente;

b) Fase móvil: acetonitrilo (cromatográficamente puro): solución de ácido fosfórico en metanol (metanol cromatográficamente puro: ácido fosfórico cromatográficamente puro

ácido=92.5:7.5)=93:7 (V: V), la relación de fase móvil se puede ajustar según los diferentes tipos de columnas cromatográficas.

c) Longitud de onda de detección: 205 nm;

d) Caudal: 1 ml/min;

e) Temperatura de medición: 30 grados;

f) Volumen de inyección: 20 μ L.

 

A.4. Elaboración de curvas estándar

Tome una serie estándar de soluciones y realice análisis cromatográficos en condiciones cromatográficas de referencia. Dibuje una curva estándar con la concentración de la solución estándar como eje x y el área del pico como eje y.

A.5.Análisis de la solución de muestra

Inyecte la solución de muestra en un cromatógrafo líquido, mida el área del pico y obtenga la concentración de fosfato idilserina en la solución de muestra que se va a analizar de acuerdo con la curva estándar.

Calcular el contenido de fosfato idilserina en la muestra según la ecuación (1):

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En la ecuación:

W - El contenido de fosfato idilserina en la muestra, en%;

ρ- La concentración de fosfato idilserina a medir obtenida de la curva de trabajo estándar, en miligramos por mililitro (mg/mL);

V - Volumen de la solución de muestra, en mililitros (mL); M - Masa de la muestra, en miligramos (mg);

K - Contenido de sustancia estándar.

Tome como resultado la media aritmética de los resultados de dos mediciones paralelas.

Desviación permitida

La diferencia entre dos mediciones de una misma muestra no excederá el 10% del promedio de las dos mediciones.

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